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正確使用和維護(hù)對(duì)c18 色譜柱十分重要

更新時(shí)間:2020-07-17        閱讀:1821
  在高效液相色譜分析系統(tǒng)中,對(duì)c18 色譜柱溫度控制的要求越來(lái)越高。正確的控制色譜柱的溫度對(duì)于提高柱效、改善峰分離度、保證重現(xiàn)性、以達(dá)預(yù)期的分析結(jié)果,具有不容忽視的作用
 
  C18色譜柱應(yīng)用領(lǐng)域:
  強(qiáng)極性和堿性化合物、藥物、抗生素、肽和蛋白質(zhì)。
 

  性能優(yōu)點(diǎn):
  1、使用高純度的硅膠基質(zhì);
  2、流動(dòng)相可以使用100%水溶液的高效液相色譜柱;
  3、對(duì)親水性化合物的保留強(qiáng);
  4、對(duì)于堿性化合物分離良好。
 
  c18 色譜柱的正確使用和維護(hù)十分重要,稍有不慎就會(huì)降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。下面,武漢恒信世紀(jì)科技有限公司就為大家列舉在色譜操作過(guò)程中,需要注意下列問(wèn)題,以維護(hù)。
  1、避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動(dòng)。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會(huì)影響柱內(nèi)的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會(huì)沖動(dòng)柱內(nèi)填料,因此在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行,在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動(dòng)不能過(guò)緩(如前所述)。
  2、應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成,特別是反相色譜中,不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬?,反之亦然?/div>
  3、一般說(shuō)來(lái)色譜柱不能反沖,只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時(shí),才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會(huì)迅速降低柱效。
  4、選擇使用適宜的流動(dòng)相(尤其是pH),以避免固定相被破壞。有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一預(yù)柱,分析柱是鍵合硅膠時(shí),預(yù)柱為硅膠,可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠“飽和”,避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。
  5、避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內(nèi),需要對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一保護(hù)柱。保護(hù)柱一般是填有相似固定相的短柱。保護(hù)柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換。
  6、經(jīng)常用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱,清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì)。在進(jìn)行清洗時(shí),對(duì)流路系統(tǒng)中流動(dòng)相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過(guò)渡,每種流動(dòng)相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右,即常規(guī)分析需要50~75ml。

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